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手動生化

服務詳情

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肉桂醇脫氫酶(CAD)(檢測服務)

肉桂醇脫氫酶(CAD)檢測試劑盒(肉桂酸比色法)檢測原理是以肉桂酸、NADP作為底物,在酶促反應的最適條件下采用每隔一定時間測定產(chǎn)物生成量的方法,于分光光度計340nm處檢測吸光度,以吸光度變化所需酶量進行計算,主要用于植物組織的裂解液或勻漿液、血清等樣品中內(nèi)源性的肉桂醇脫氫酶活性,尤其適用于檢測水果中肉桂醇脫氫酶活性,25T可以檢測23~24個樣品

價格:¥20.00

規(guī)格:反應

貨號:ST1475

品牌:LEAGENE

 服務介紹:

        肉桂醇脫氫酶(CAD)檢測試劑盒(肉桂酸比色法)檢測原理是以肉桂酸、NADP作為底物,在酶促反應的最適條件下采用每隔一定時間測定產(chǎn)物生成量的方法,于分光光度計340nm處檢測吸光度,以吸光度變化所需酶量進行計算,主要用于植物組織的裂解液或勻漿液、血清等樣品中內(nèi)源性的肉桂醇脫氫酶活性,尤其適用于檢測水果中肉桂醇脫氫酶活性,25T可以檢測23~24個樣品

貨號

名稱

規(guī)格

價格

ST1475

肉桂醇脫氫酶(CAD)檢測試劑盒

反應

20

實驗流程:

1.、準備樣品:

植物樣品:取1g植物組織或水果中層果肉置于液氮中迅速研磨或勻漿,加1~1.2ml預冷的CAD Lysis Buffer,4℃ 10000r/min離心15~20min,留取上清液

血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定,-20℃凍存,用于肉桂醇脫氫酶的檢測。

細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織裂解液,如有必要用CAD Lysis Buffer進行適當勻漿,4℃ 10000r/min離心15~20min,取上清液

高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的肉桂醇脫氫酶,可以使用CAD Lysis Buffer稀釋進行恰當?shù)南♂尅?/span>

2、配制CAD Assay Buffer工作液:取1支NADP完全溶解于10ml CAD Assay Buffer,即為CAD Assay Buffer工作液

3、CAD加樣:按照下表設置對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入

加入物(ml)

對照管

測定管

CAD   Lysis buffer

0.2

待測樣品

0.2

CAD   Assay buffer工作液

0.8

0.8

 4、CAD檢測:以對照管為對照(調零),比色杯光徑1.0cm,分光光度計立即測定340nm測定管的吸光度(記為A測定0),37℃準確孵育10min,立即加入0.05ml CAD終止液終止反應(備選方案),以對照管為對照(調零),分光光度計立即測定340nm測定管的吸光度(記為A測定1)。

實驗結果:

全自動生化儀檢測后導出結果,結果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運輸要求:

1、動植物組織樣本(干冰運輸)

準確稱取動物組織重量按重量(mg):體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,機械勻漿,制備成10%的勻漿液,2500~3000轉/分鐘,離心10分鐘,取上清液進行測定。

2、血清樣本(干冰運輸)

全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜(GLU檢測請勿全血樣本放置過夜取血清)后于2-8℃ 3000轉/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。

3、血漿樣本(干冰運輸)

可用肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。

4、細胞樣本

貼壁細胞:將細胞用PBS沖洗2次后,用細胞刮將細胞小心刮下來,將培養(yǎng)液3000轉/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。

懸浮細胞:將培養(yǎng)液3000轉/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。

細胞上清:標本于2-8℃,3000轉/分離心15min取上清,上清立即用于實驗,或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復凍融。

僅供科研用途,不可用于臨床診斷!

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